Дијагностичка вирусологија

Дијагностичка вирусологија (енгл. Диагностиц Вирусологy) је скуп метода лабораторијске дијагностике вирусних инфекција. Дијагностичка вирологија је у 21. веку доживела читав низ брзих промена услед појаве молекуларних техника и повећане клиничке осетљивости серолошких испитивања.[1]

Рад у дијагностичкој вирусологији захтева примену заштитних средстава

Значај уреди

Дијагностичка вирусологија је од изузетног значај код вирусних инфекција у неким областима клиничке медицине, код:

  • имунокомпромитованих пацијента,
  • болесника са трансплантираним оганима,
  • трансплантације коштане сржи,
  • ХИВ позитивних пацијента,
  • пацијенте са сексуално преносивим болестима,
  • акутних респираторних инфекција,
  • гастроинтестиналних инфекција (нарочито код мале деце, али и код одраслих),
  • инфекција сличним мононуклеози,
  • акутних или хроничних вирусних хепатитисиа,
  • тешких инфекција ока,
  • код новорођене деце и фетусе са конгениталним инфекцијама.[1]

Дијагностика вирусолошка такође има посебан значај за јавно здравље, јер успешно, идентификује узрочника респираторних инфекција и круцијална је за препознавање нових сојева вируса инфлуенце и може иницирати програм масовне имунизације у случају појаве епидемије.[2]

Методе уреди

 
Електронски микроскоп
 
ЕЛИСА тест
 
ПЦР тест

Од најпознатијих метода вирусологије у клиничкој лабораторисјкој дијагностици се примењују:

Визуелизација вируса електронским микроскопом уреди

Електронска микроскопија је сложена, скупа, технички компликована метода дијагностике вируса, која захтева добро обучен кадар, који је само један од недостатака методе. У друге недостке спадају:

  • ниска осетљивост (потребно је > 106 вирусних честица/мл или гр узорка),
  • вируси који имају исте морфолошке карактеристике (облик, величину и симетрију) односно припадају истој фамилији не могу се диференцирати електронском микроскопијом.

Зато је ова метода углавном ограничене употребе, која се своди на истраживачке лабораторије и центре.[3][4]

Детекција вирусних антигена уреди

Ова мерода се заснива на имунофлуоресценција, имуноензимским тестовима (имунопероксидаза, ЕЛИСА, аглутинација). Најчешће се методама детекције вирусних антигена, користи за њихову идентификују:[1]

У узорцима из респираторног тракта — идентификују се: респираторни синцицијални вирус (РСВ), вируса инфлуенце и параинфлуенце, аденовируси

У узорцима из кожних лезија — идентификује се ХСВ и ВЗВ

У узорку столице — идентификује се ротавирус

У узорцима крви пацијента — идентификује се ХСВ и ВЗВ и CMV и хепатитис Б вирус (површински антиген)

Детекција вирусног генома уреди

Детекција вирусног генома је молекуларна техника која се заснива на ПЦР, другим техникама амплификације нуклеинских киселина, ДНК или РНК хибридизацији и секвенцирање нуклеинских киселина

Детекција вирусног генома у новије време се показалае као добра метода, код вирусног генома (ДНК или РНК) за:[1]

 
Изолација вируса из ембрионисаних јаја
 
Тест инхибиције хемаглутинације
  • откривање нових вируса,
  • испитивање резистенције вируса,
  • дизајнирање нових антивирусних лекова,
  • дизајнирање вакцина.

Изолоција вируса (ћелијска култура) уреди

Изолација вируса или ћелијска култура, може да буде из:

  • ембрионисаних јаја,
  • лабораторијске животиње.

Доказивање антивирусних антитела у серуму (серологија) уреди

Серологија се заснива на:

  • тесту неутрализације,
  • тесту инхибиције хемаглутинације,
  • тесту аглутинације,
  • тесту фиксације комплемента,
  • ЕЛИСА,
  • имунофлуоресценцији,
  • вестерн блот техници.

Изолација вируса у ћелијској култури, иако је врло сензитивна и специфична метода, примењује се само у боље опремљеним лабораторијама јер захтева специфичну опрему и одређено искуство микробиолога.

Дијагностичка примена серолошких тестова уреди

Неки од примера дијагностичке примене серолошких тестова у вирусологији приказан је у доњој табели:[5]

Дијагностичка примена серолошких техника
Тест Пимери примене теста
Фиксација комплемента
  • Детекција антитела специфичних за респираторне вирусе
ЕЛИСА
  • ИгГ/ИгМ антитела - рубела, морбили, мумпс, ХИВ, хепатитис А
  • Антигени - ХБс у серуму, норовируса и ротавируса у столиици
Имунофлуоресценција
  • ИгГ/ИгМ антитела - ЕБВ,ВЗВ
  • Антиген – РСВ, инфлуенца и други респираторни вируси у респираторним секретима
Аглутинација
  • Антитела - рубела, токсоплазма
  • Антиген - ротавирус, норовирус
Вестерн блот и
рекомбинантни имуновезујући есеји
  • Потврдни за ХИВ и ХЦВ

Извори уреди

  1. ^ а б в г Невена Арсеновић-Ранин, Марина Миленковић, Зорица Стојић-Вуканић, Имунолошке и молекуларне технике у лабораторијској дијагностици вирусних инфекција, Арх.фарм. 2010;60: пп. 1257
  2. ^ Сторцх ГА. Диагностиц Вирологy. Ин: Книпе ДМ, Хоwлеy ПМ. Фиелдс Вирологy. 4тх ед. Липпинцотт Wиллиамс & Wилкинс, 2001: 493-531.
  3. ^ Кудесиа Г, Wрегхитт. Цлиницал анд Диагностиц Вирологy. Цамбридге Университy Пресс, 2009.
  4. ^ Мурраy ПР, Wитебскy ФГ. Тхе Цлинициан анд тхе Мицробиологy Лабораторy. Ин: Манделл, Доуглас анд Беннетт´с принциплес анд працтице оф инфецтиоус дисеасес, едс. Гералд L. Манделл, Јохн Е. Беннетт, Рапхаел Долин. 7тх ед., Цхурцхилл Ливингстоне Елсевиер, 2010: 233-65.
  5. ^ Невена Арсеновић-Ранин, Марина Миленковић, Зорица Стојић-Вуканић, Имунолошке и молекуларне технике у лабораторијској дијагностици вирусних инфекција, Арх.фарм. 2010;60: пп. 1268

Спољашње везе уреди

 Молимо Вас, обратите пажњу на важно упозорење
у вези са темама из области медицине (здравља).