Википедија

Test penetracije

Test penetracije, test hrčka ili test penetracije jajeta hrčka (HEPT), je laboratorijski test za predviđanje kapaciteta muške sperme da oplodi žensko jaje. U laboratoriji se sperma spaja sa pripremljenim jajnim ćelijama hrčaka. Ovim testom se izračunava procenat jajnih ćelija koje su penetrirane ili prosečan broj penetracija spermatozoida po jajnoj ćeliji koje mogu da prođu kroz neophodne fiziološke promene za oplodnju.[1] Time se ispituje na indirektan način fertilizaciona sposobnost spermatozoida pacijenta.[2]

Test penetracije
U testu penetracije koristi se hrčak

Istorija uredi

Test penetracije sperme je prvi put razvijen 1970-ih, kada je 1976. godine, Yanagimachi sa saradnicimi koji su primetili da su po uklanjanju pelucidne zone jajnih ćelija hrčaka, jaja bila „promiskuitetna“ i dozvoljavala prodiranje spermatozoida drugih vrsta.[3] Na osnovu ovih saznanja započeto je sa merenjem sposobnosti spermatozoida da se podvrgnu kapacitaciji, spajanju sa membranom jajeta i dekondenziranju glave sperme, što dovodi do formiranja muškog pronukleusa. Iako su brojne studije pokazale da je ovaj test koristan prediktor oplodnje kod konvencionalne vantelesne oplodnje (IVF), test je bio opterećen lažno negativnim rezultatima i varijabilnosti testa.[1]

Sledilo je poboljšanje ovog testa od strane Johnson-a i njegovih saradnika,[4] koje se odnosilo na promene uslova za povećanje stope penetracije spermatozoida za redove veličine i osmišljavanje kontrolne metode kako bi se osigurala preciznost i tačnost analize.[5] Pozitivan rezultat na ovom testu bio je veoma prediktivni za pozitivan ishod u vantelesnoj oplodnji.[6][7]

Sledila je modifikacija ovog testa korišćena u kombinaciji sa intracitoplazmatskom ubrizgavanjem sperme (ICSI) u oocite hrčka, koja je preciznije identifikovala pacijente sa muškim faktorom koji nisu uspeli da se oplode nakon IVF/ICSI zbog defekta u dekondenzaciji sperme.[8]

Neopravdano, danas se test retko naručuje uprkos tome što pruža korisne informacije i mnogo je jeftiniji od drugih testova.[1]

Opšte informacije uredi

Neplodnost je teško i stresno stanje i za pacijente i za lekare. Neuspeh u začeću u roku od 1 godine javlja se kod oko 15% parova,[9] a oko 50% problema vezanih za začeće u potpunosti je uzrokovano muškim ili kombinovanim problemom kod muškarca i njegove partnerke. Muška neplodnost i dalje je klinički izazov od sve većeg značaja. Rutinska analiza sperme ostaje kamen temeljac u proceni muškog faktora neplodnosti, međutim, dijagnostičke mogućnosti koje su trenutno dostupne za pomoć u formulisanju dijagnoze brzo su evoluirale i uključuju specijalizovane funkcionalne testove.[1]

Čak i muškarci sa normalnim parametrima sperme možda neće biti plodni, što zahteva razvoj testova dizajniranih za merenje funkcija spermatozoida kao što su penetracija cervikalne sluzi, kapacitacija, vezivanje sperme-zona pellucida, vezivanje sperme-jajnih ćelija, penetracija spermatozoida reakcije akrozoma i dekondenzacija.[1]

Način izvođenja testa uredi

Za izvođenje testa penetracije koriste se jajne ćelije ženskog hrčka, stara između 7 i 12 nedelja. Ona u testu služe kao zamena za humane ženske jajne ćelije, koje se teže i složenije dobijaju.[1]

Ejakulat se masturbacijom sakuplja u posudu sa širokim otvorom, koji obezbeđuje lekar, i ostavlja se da se razblaži 30 minuta na 37 °C. Kvalitet sperme se procenjuje posmatranjem slajdova nerazređene sperme zagrejane na 37 °C sa uvećanjem od 400h pod faznim kontrastom.[1]

Pre testa jajne ćelije hrčka se oslobođene od omotača (zona pellucida), koji je glavna prepreka za prodor spermatozoida u jajnu ćeliju druge vrste.

Potom se pripremljena sperma inkubira sa 15 do 20 jajnih ćelija hrčaka. Ako sperma funkcioniše ispravno, ona će moći da prodre u jajne ćelije hrčka. Test se prekida nakon tri sata i sva jaja se fiksiraju na staklene pločice za analizu.[2]

Manje od 50% penetriranih jajnih ćelija može značiti da sperma ima ograničen kapacitet za oplodnju. Međutim, ako je penetracija iznad 50%, sperma bi trebalo da ima sposobnost oplodnje. Ako je broj penetracije nizak, lekar može preporučiti ubrizgavanje intracitoplazmatske sperme tokom tretmana vantelesne oplodnje.[2]

Ako se u ovom testu nađe da je penetracija spermatozoida manje od 10% jajnih ćelija u pitanju je spermatozoidna disfunkcija koja je karakteristična za infertilne muškarce.

Indikacije uredi

Test se koristi za identifikaciju onih parova koji mogu imati veliku verovatnoću uspeha za vantelesnom oplodnjom, a preporučuje se:

  • Pre primene skupih metoda veštačke oplodnje radi procene verovatnoće uspeha veštačke oplodnje.
  • Kada se uzrok infertilnosti muškarca ne može objasniti.

Nedostaci uredi

Test penetracije ima nedostatak što njegovi rezultati ne ukazuju sa sigurnošću na ponašanje spermatozoida u ženskim polnim organima.[10]

Izvori uredi

  1. ^ a b v g d đ e Kathleen Hwang, Dolores J. Lamb, The Sperm Penetration Assay for the Assessment of Fertilization Capacity. . . Methods Mol Biol. 927. 2013. str. 103—111.  Nedostaje ili je prazan parametar |title= (pomoć).
  2. ^ a b v „Sperm Penetration Assay | Male Fertility Testing | LLU Fertility”. Loma Linda University Center for Fertility & IVF (na jeziku: engleski). Pristupljeno 2023-02-26. 
  3. ^ Yanagimachi, R.; Yanagimachi, H.; Rogers, B. J. (1976). „The use of zona-free animal ova as a test-system for the assessment of the fertilizing capacity of human spermatozoa”. Biol Reprod. 15 (4): 471—476. PMID 974200. S2CID 18988034. doi:10.1095/biolreprod15.4.471. .
  4. ^ Johnson, A.; Bassham, B.; Lipshultz, L. I.; Lamb, D. J. (1995). „A quality control system for the optimized sperm penetration assay”. Fertil Steril. 64 (4): 832—837. PMID 7672158. doi:10.1016/S0015-0282(16)57862-5. .
  5. ^ Aron, Johnson; Smith, Roy G.; Bassham, Brenda; Lipshultz, Larry I.; Lamb, Dolores J. (1991). „The microsperm penetration assay: development of a sperm penetration assay suitable for oligospermic males”. Fertil Steril. 56 (3): 528—534. PMID 1894032. doi:10.1016/S0015-0282(16)54553-1. .
  6. ^ Freeman, M. R.; Archibong, A. E.; Mrotek, J. J.; Whitworth, C. M.; Weitzman, G. A.; Hill, G. A. (2001). „Male partner screening before in vitro fertilization: preselecting patients who require intracytoplasmic sperm injection with the sperm penetration assay”. Fertil Steril. 76 (6): 1113—1118. PMID 11730736. doi:10.1016/S0015-0282(01)02890-4. .
  7. ^ Soffer, Y.; Golan, A.; Herman, A.; Pansky, M.; Caspi, E.; Ron-El, R. (1992). „Prediction of in vitro fertilization outcome by sperm penetration assay with TEST-yolk buffer preincubation”. Fertil Steril. 58 (3): 556—562. PMID 1521652. doi:10.1016/S0015-0282(16)55263-7. .
  8. ^ Gvakharia, M. O.; Lipshultz, L. I.; Lamb, D. J. (2000). „Human sperm microinjection into hamster oocytes: a new tool for training and evaluation of the technical proficiency of intracytoplasmic sperm injection”. Fertil Steril. 73 (2): 395—401. PMID 10685549. doi:10.1016/S0015-0282(99)00500-2. .
  9. ^ Thonneau, P.; Marchand, S.; Tallec, A.; Ferial, M. L.; Ducot, B.; Lansac, J.; Lopes, P.; Tabaste, J. M.; Spira, A. (1991). „Incidence and main causes of infertility in a resident population (1,850,000) of three French regions (1988-1989)”. Hum Reprod. 6 (6): 811—816. PMID 1757519. doi:10.1093/oxfordjournals.humrep.a137433. .
  10. ^ Karp, L. E.; Williamson, R. A.; Moore, D. E.; Shy, K. K.; Plymate, S. R.; Smith, W. D. (1981). „Sperm penetration assay: useful test in evaluation of male fertility”. Obstetrics and Gynecology. 57 (5): 620—623. ISSN 0029-7844. PMID 7219910. 

Literatura uredi

  • Yanagimachi, R.; Yanagimachi, H.; Rogers, B. J. (1976). „The use of zona-free animal ova as a test-system for the assessment of the fertilizing capacity of human spermatozoa”. Biol Reprod. 15 (4): 471—476. PMID 974200. S2CID 18988034. doi:10.1095/biolreprod15.4.471. .
  • Johnson, A.; Bassham, B.; Lipshultz, L. I.; Lamb, D. J. (1995). „A quality control system for the optimized sperm penetration assay”. Fertil Steril. 64 (4): 832—837. PMID 7672158. doi:10.1016/S0015-0282(16)57862-5. .
  • Aron, Johnson; Smith, Roy G.; Bassham, Brenda; Lipshultz, Larry I.; Lamb, Dolores J. (1991). „The microsperm penetration assay: development of a sperm penetration assay suitable for oligospermic males”. Fertil Steril. 56 (3): 528—534. PMID 1894032. doi:10.1016/S0015-0282(16)54553-1. .
  • Freeman, M. R.; Archibong, A. E.; Mrotek, J. J.; Whitworth, C. M.; Weitzman, G. A.; Hill, G. A. (2001). „Male partner screening before in vitro fertilization: preselecting patients who require intracytoplasmic sperm injection with the sperm penetration assay”. Fertil Steril. 76 (6): 1113—1118. PMID 11730736. doi:10.1016/S0015-0282(01)02890-4. .

Spoljašnje veze uredi

 Molimo Vas, obratite pažnju na važno upozorenje
u vezi sa temama iz oblasti medicine (zdravlja).
Preuzeto iz „https://sr.wikipedia.org/w/index.php?title=Тест_пенетрације&oldid=27543691”