Glikoproteini su proteini koji sadrže oligosaharidne lance (glikane) kovalentno vezane za polipeptidne bočne lance. Ugljeni hidrati se vezuju za protein tokom kotranslacionih ili posttranslacionih modifikacija. Taj proces je poznat kao glikozilacija. Izlučeni ekstracelularni proteini su često glikozilovani. U proteinima čiji se segmenti nalaze u ekstracelularnom prostoru, spoljašnji segmenti su takođe glikozilovani. Glikoproteini su često važni integralni membranski proteini, koji učestvuju u međućelijskim interakcijama. Glikoproteini se takođe formiraju u citosolu, ali su njihove funkcije i način na koji se formiraju te modifikacije manje poznate.[2] Nasuprot tome, klasična sekretorna glikozilacija može biti strukturno bitna. Na primer, inhibicija asparagin-vezane, tj. N-vezane, glikozilacije može sprečiti pravilno savijanje glikoproteina i puna inhibicija može biti toksična za pojedinačnu ćeliju. Nasuprot tome, poremećaj procesiranja glikana (enzimsko uklanjanje/dodavanje ostataka ugljenih hidrata u glikan), koji se javlja i u endoplazmatskom retikulumu i u Golgijevom aparatu, je neophodan za izolovane ćelije (kao dokaz preživljavanja sa inhibitorima glikozida), ali može dovesti do ljudske bolest (urođeni poremećaji glikozilacije) i može biti smrtonosan u životinjskim modelima. Stoga je verovatno da je fina obrada glikana važna za endogenu funkcionalnost, kao što je razmena ćelijama, ali da je to verovatno bilo sekundarno u odnosu na njegovu ulogu u interakcijama domaćin-patogen. Čuveni primer ovog poslednjeg efekta je ABO sistem krvnih grupa.

N-vezana proteinska glikozilacija (N-glikozilacija N-glikana) na Asn ostatku (Asn-x-Ser/Thr motivima) u glikoproteinima.[1]

Takođe je poznato da se glikozilacija javlja na nukleocitoplazmatskim proteinima u obliku O-GlcNAc.[3]

Tipovi glikozilacijeУреди

Postoji nekoliko vrsta glikozilacije, iako su prve dve najčešće.

MonosaharidiУреди

 
Osam šećera koji se obično nalaze u glikoproteinima.

Monosaharidi koji se obično nalaze u eukariotskim glikoproteinima uključuju:[5]:526

Glavni šećeri koji se nalaze u ljudskim glikoproteinima[6]
Šećer Tip Skraćenica
β-D-Glukoza Heksoza Glc
β-D-Galaktoza Heksoza Gal
β-D-Manoza Heksoza Man
α-L-Fukoza Deoksiheksoza Fuc
N-Acetilgalaktozamin Aminoheksoza GalNAc
N-Acetilglukozamin Aminoheksoza GlcNAc
N-Acetilneuraminska kiselina Aminononulosonska kiselina
(Sijalinska kiselina)
NeuNAc
Ksiloza Pentoza Xyl

Šećerne grupe mogu pomoći u savijanju proteina, poboljšati stabilnost proteina i uključene su u ćelijsku signalizaciju.

PrimeriУреди

Jedan primer glikoproteina koji se nalazi u telu su mucini, koji se luči u sluzi respiratornog i digestivnog trakta. Šećeri kada su vezani za mucine daju im značajan kapacitet zadržavanja vode i takođe ih čine otpornim na proteolizu digestivnih enzima.

Glikoproteini su važni za prepoznavanje belih krvnih zrnaca. Primeri glikoproteina u imunološkom sistemu su:

H antigen pripada grupi ABO antigena kompatibilnosti krvi.

Drugi primeri glikoproteina uključuju:

Rastvorljivi glikoproteini često pokazuju visok viskozitet, na primer, u belancima jajeta i krvnoj plazmi.

Varijabilni površinski glikoproteini omogućavaju parazitu Trypanosoma koji je uzročnik bolesti spavanja da izbegne imuni odgovor domaćina.

Virusni šiljak virusa humane imunodeficijencije je u znatnoj meri glikoziliran.[8] Približno polovina mase šiljaka je ishod glikozilacije, i glikani deluju tako da ograničavaju prepoznavanje antitela, jer glikane sastavlja ćelija domaćin i tako su uglavnom „svojstveni“ njoj. Vremenom, neki pacijenti mogu da evoluiraju antitela da prepoznaju HIV glikane, a skoro sva takozvana „široko neutrališuća antitela (bnAbs) prepoznaju neke glikane. Ovo je moguće uglavnom zato što neuobičajeno visoka gustina glikana ometa normalno sazrevanje glikana i zbog toga su zarobljeni u preranom stanju sa visokim sadržajem manoze.[9][10] Ovo pruža prozor za imunološko prepoznavanje. Pored toga, pošto su ovi glikani mnogo manje varijabilni od osnovnog proteina, oni su se pojavili kao obećavajuće mete za dizajn vakcine.[11]

HormoniУреди

Hormoni koji su glikoproteini obuhvataju:

Razlika između glikoproteina i proteoglikanaУреди

Citiranje preporuka za IUPAC:[12]

Glikoprotein je jedinjenje koje sadrži ugljene hidrate (ili glikane) kovalentno vezane za protein. Ugljeni hidrat može biti u obliku monosaharida, disaharida, oligosaharida, polisaharida ili njihovih derivata (npr. sulfo- ili fosfo-supstituisanih). Može biti prisutna jedna, nekoliko ili više jedinica ugljenih hidrata. Proteoglikani su podklasa glikoproteina u kojima su jedinice ugljenih hidrata polisaharidi koji sadrže aminošećere. Takvi polisaharidi su takođe poznati kao glikozaminoglikani.

FunkcijeУреди

Neke od funkcija koje obavljaju glikoproteini[5]:524
Funkcija Glikoproteini
Strukturni molekul Kolageni
Lubrikant i zaštitni agens Mucini
Transportni molekul Transferin, ceruloplazmin
Imunološki molekul Imunoglobulini,[13] antigeni histokompatibilnosti
Hormon Humani horionski gonadotropin (HCG), tireostimulišući hormon (TSH)
Enzim Razni, e.g., alkalna fosfataza, patatin
Mesto za prepoznavanje vezivanja ćelije Različiti proteini uključeni u interakciju ćelija-ćelija (npr. sperma-oocit), virus-ćelija, bakterija-ćelija i hormon-ćelija
Antifrizni protein Određeni proteini plazme hladnovodnih riba
Interakcija sa specifičnim ugljenim hidratima Lektini, selektini (lektini ćelijske adhezije), antitela
Receptor Različiti proteini uključeni u delovanje hormona i lekova
Utiče na savijanje određenih proteina Kalneksin, kalretikulin
Regulacija razvoja Noč i njegovi analozi, ključni proteini u razviću
Hemostaza (i tromboza) Specifični glikoproteini na površinskim membranama trombocita

AnalizaУреди

Različite metode koje se koriste u detekciji, prečišćavanju i strukturnoj analizi glikoproteina su[5]:525[13][14]

Neke važne metode koje se koriste za proučavanje glikoproteina
Methoda Upotreba
Periodična kiselina-Šifova boja Otkriva glikoproteine kao ružičaste trake nakon elektroforetskog odvajanja.
Inkubacija kultivisanih ćelija sa glikoproteinima kao trakama radioaktivnog raspada Dovodi do detekcije radioaktivnog šećera nakon elektroforetskog odvajanja.
Tretman odgovarajućom endo- ili egzoglikozidazom ili fosfolipazama. Rezultirajuće promene u elektroforetskoj migraciji pomažu da se napravi razlika između proteina sa N-glikanom, O-glikanom ili GPI vezama, kao i između visoko manoznih i kompleksnih N-glikana.
Agarozno-lektinska hromatografska kolona, hromatografija lektinskog afiniteta Za prečišćavanje glikoproteina ili glikopeptida koji vezuju određeni lektin koji se koristi.
Lektinska afinitetna elektroforeza Nastali pomaci u elektroforetskoj migraciji pomažu u razlikovanju i karakterizaciji glikoforma, tj. varijante glikoproteina koje se razlikuju u ugljenim hidratima.
Analiza sastava nakon kisele hidrolize Identifikuje šećere koje glikoprotein sadrži i njihovu stehiometriju.
Masena spektrometrija Pruža informacije o molekularnoj masi, sastavu, sekvenci i ponekad grananju lanca glikana. Takođe se može koristiti za lokaciono specifično profilisanje glikozilacije.[13]
NMR spektroskopija Da se identifikuju specifični šećeri, njihov redosled, veze i anomerna priroda glikozidnog lanca.
Višeugaono rasipanje svetlosti U sprezi sa hromatografijom veličinskog isključivanja, UV/Vis apsorpcijom i diferencijalnom refraktometrijom, pruža informacije o molekularnoj masi, odnosu proteina i ugljenih hidrata, stanju agregacije, veličini i ponekad grananju glikanskog lanca. U spoju sa analizom gradijenta kompozicije, analizira samo- i hetero-asocijaciju da bi se odredio afinitet vezivanja i stehiometrija sa proteinima ili ugljenim hidratima u rastvoru bez obeležavanja.
Dualna polarizaciona interferometrija Meri mehanizme koji leže u osnovi biomolekularnih interakcija, uključujući brzine reakcija, afinitete i povezane konformacione promene.
Metilaciona (vezna) analiza Da bi se utvrdila veza između šećera.
Aminokiselinsko ili cDNK sekvenciranje Determinacija aminokiselinske sekvence.

Vidi jošУреди

ReferenceУреди

  1. ^ Ruddock & Molinari (2006) Journal of Cell Science 119, 4373–4380
  2. ^ Funakoshi Y, Suzuki T (2009). „Glycobiology in the cytosol: The bitter side of a sweet world”. Biochim. Biophys. Acta. 1790 (2): 81—94. PMID 18952151. doi:10.1016/j.bbagen.2008.09.009. 
  3. ^ Gw, Hart (2014-10-27). „Three Decades of Research on O-GlcNAcylation - A Major Nutrient Sensor That Regulates Signaling, Transcription and Cellular Metabolism”. Frontiers in endocrinology (на језику: енглески). PMID 25386167. Приступљено 2020-06-01. 
  4. ^ Stepper, Judith; Shastri, Shilpa; Loo, Trevor S.; Preston, Joanne C.; Novak, Petr; Man, Petr; Moore, Christopher H.; Havlíček, Vladimír; Patchett, Mark L. (2011-01-18). „CysteineS-glycosylation, a new post-translational modification found in glycopeptide bacteriocins”. FEBS Letters (на језику: енглески). 585 (4): 645—650. ISSN 0014-5793. PMID 21251913. doi:10.1016/j.febslet.2011.01.023 . 
  5. ^ а б в Robert K. Murray, Daryl K. Granner & Victor W. Rodwell: "Harper's Illustrated Biochemistry 27th Ed.", McGraw–Hill, 2006
  6. ^ Glycan classification Архивирано на сајту Wayback Machine (27. октобар 2012) SIGMA
  7. ^ Theerasilp S, Kurihara Y (август 1988). „Complete purification and characterization of the taste-modifying protein, miraculin, from miracle fruit”. J. Biol. Chem. 263 (23): 11536—9. PMID 3403544. Архивирано из оригинала на датум 27. 08. 2005. Приступљено 02. 11. 2021. 
  8. ^ Pritchard, Laura K.; Vasiljevic, Snezana; Ozorowski, Gabriel; Seabright, Gemma E.; Cupo, Albert; Ringe, Rajesh; Kim, Helen J.; Sanders, Rogier W.; Doores, Katie J. (2015-06-16). „Structural Constraints Determine the Glycosylation of HIV-1 Envelope Trimers”. Cell Reports (на језику: енглески). 11 (10): 1604—1613. ISSN 2211-1247. PMC 4555872 . PMID 26051934. doi:10.1016/j.celrep.2015.05.017. 
  9. ^ Pritchard, Laura K.; Spencer, Daniel I. R.; Royle, Louise; Bonomelli, Camille; Seabright, Gemma E.; Behrens, Anna-Janina; Kulp, Daniel W.; Menis, Sergey; Krumm, Stefanie A. (2015-06-24). „Glycan clustering stabilizes the mannose patch of HIV-1 and preserves vulnerability to broadly neutralizing antibodies”. Nature Communications (на језику: енглески). 6: 7479. Bibcode:2015NatCo...6.7479P. PMC 4500839 . PMID 26105115. doi:10.1038/ncomms8479. 
  10. ^ Behrens, Anna-Janina; Vasiljevic, Snezana; Pritchard, Laura K.; Harvey, David J.; Andev, Rajinder S.; Krumm, Stefanie A.; Struwe, Weston B.; Cupo, Albert; Kumar, Abhinav (2016-03-10). „Composition and Antigenic Effects of Individual Glycan Sites of a Trimeric HIV-1 Envelope Glycoprotein”. Cell Reports (на језику: енглески). 14 (11): 2695—2706. ISSN 2211-1247. PMC 4805854 . PMID 26972002. doi:10.1016/j.celrep.2016.02.058. 
  11. ^ Crispin, Max; Doores, Katie J (2015-04-01). „Targeting host-derived glycans on enveloped viruses for antibody-based vaccine design”. Current Opinion in Virology. Viral pathogenesis • Preventive and therapeutic vaccines. 11: 63—69. PMC 4827424 . PMID 25747313. doi:10.1016/j.coviro.2015.02.002. 
  12. ^ „Nomenclature of glycoproteins, glycopeptides and peptidoglycans, Recommendations 1985”. www.qmul.ac.uk. Приступљено 16. 3. 2021. 
  13. ^ а б в Maverakis E, Kim K, Shimoda M, Gershwin M, Patel F, Wilken R, Raychaudhuri S, Ruhaak LR, Lebrilla CB (2015). „Glycans in the immune system and The Altered Glycan Theory of Autoimmunity”. J Autoimmun. 57 (6): 1—13. PMC 4340844 . PMID 25578468. doi:10.1016/j.jaut.2014.12.002. 
  14. ^ Dell A (2001). „Glycoprotein Structure Determination by Mass Spectrometry”. Science. 291 (5512): 2351—2356. Bibcode:2001Sci...291.2351D. ISSN 0036-8075. PMID 11269315. doi:10.1126/science.1058890. 

Spoljašnje vezeУреди